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温州代怀_凝集反应——万融实验

时间:2022-07-30 浏览量: 943

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颗粒性抗原与响应抗体以适合的比例产生特异性反映时,正在必然温度跟电解质存在的前提下,造成肉眼可见的凝聚物,称为凝集反应(agglutination)。颗粒性抗原与响应抗体正在必然的前提下,间接反映发生凝聚景象,称为间接凝集反应。将可溶性抗原或抗体吸附于与免疫有关的载体概况,然后与响应的抗体或抗原反映,造成肉眼可见的凝聚物,称为直接凝集反应。此中将抗体吸附于载体概况检测抗原的直接凝集反应,称为反向直接凝聚实验。

一、ABO血型测定(玻片凝集反应)

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【试验原理】红细胞概况有血型抗原A跟/或B,当与响应的抗体(抗A、抗B)相遇时,正在必然前提下反映,造成肉眼可见的凝聚物。常采取玻片凝集反应。

【资料与仪器】

1. 尺度抗A跟抗B血清、生理盐水(N S)、碘酒、75%酒精。

2. 干净载玻片、试管、无菌采血针、消毒棉签等。

【试验方式】

1. 制备红细胞悬液:碘酒、酒精消毒无名指指端,用灭菌采血针采血,滴入加有0.5ml生理盐水的试管中,混匀,制成红细胞悬液。

2. 与干净载玻片一张,正在载玻片两头离别参加抗A、抗B血清各一滴。

3. 减红细胞悬液各一滴,混匀,10~15min内窥察成果,呈现凝聚物为凝集反应阳性。

4. 需要时正在低倍镜下窥察凝聚景象(图1-1)。

图1-1 玻片凝集反应

【试验成果】

与抗A血清产生凝聚者为A型血;与抗B血清产生凝聚者为B型血;与抗A、抗B血清均产生凝聚者为AB型血;与抗A、抗B血清均没有产生凝聚者为O型血。

【思考题】

1. A血型的人含有哪种抗体?位于甚么部位?AB血型的人含有甚么抗原?位于甚么部位?

2. 试举例说明玻片凝集反应的其他临床使用。

两、试管凝集反应

【试验原理】

用已知的抗原与分歧浓缩度的血清停止反映,依据凝聚景象断定血清中响应抗体的滴度,如肥达反映。

【资料与仪器】

1. 伤寒患者血清(1∶10浓缩)、伤寒杆菌O跟H抗原菌液、甲型跟乙型副伤寒杆菌“H”菌液、生理盐水。

2. 试管、试管架、滴管、吸管等。

【试验方式】

1. 与干净小试管32支,排成四排,离别标识表记标帜序号及“O”、“H”、“甲H”及“乙H”等字。

2. 用1ml吸管汲取生理盐水,每管参加0.5ml。

3. 正在每一排的第一支试管中皆参加伤寒患者(1∶10浓缩)血清0.5ml,吹吸混匀。

4. 倍比浓缩每排血清,即从已加有血清的第一管中汲取0.5ml,参加第二管,混匀后汲取0.5ml参加第三管,混匀后汲取0.5ml参加第四管,混匀后……直至第七管,混匀后汲取0.5ml弃去,第八管不加血清作为试验对照管(图1-2)。此时,每排每管的容量均为0.5ml,第一管至第七管的浓缩倍数依次为1∶20,1∶40,1∶80,1∶160……1∶1280。

图1-2 血清倍比浓缩法

5. 离别汲取伤寒杆菌O菌液0.5ml,参加第一排的各试管中;离别汲取伤寒杆菌H菌液0.5ml,参加第二排的各试管中;离别汲取甲型副伤寒杆菌H菌液0.5ml,参加第三排的各试管中;离别汲取乙型副伤寒杆菌H菌液0.5ml,参加第四排的各试管中。此时,每排各试管的血清浓缩度依次为1∶40,1∶80……1∶2560。6.将各试管振荡混匀,连同试管架置于56℃水浴箱中水浴2~4h。7.当心掏出试管架,手持试管(切记不要混匀)对光窥察试管内液体浑浊度与管底沉淀物的性状,以断定成果(表1-1)。

表1-1试管内液体浑浊度与管底凝聚物的性状

【试验成果】

第八管对照管为阴性反应,以“++”阳性反应的最高浓缩倍数为血清抗体的效价。

【思考题】

1. 试述肥达反映的断定尺度。

2.阴性反应的试管为何是平均浑浊的?

“试管婴儿”技巧有哪几个次要步调呢?一、促使卵子成熟从天然月经周期中取得的卵子发育成熟且质量好。可是,因为须要采用一些庞大的方式(频仍取血测定激素水平)猜测排卵跟难以节制排卵工夫,故有时需夜间取卵。此外,正在一个周期中仅可取得一个卵,这是不利因素。以是,现阶段常用药物安慰卵泡发育跟人为天节制排卵工夫。常用促排卵的药物有克罗米芬、人绝经期促性腺激素(HMG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG),可以零丁利用,也可以结合利用。这里仅举一种用法:正在月经周期后3~ 7天,天天口服100毫克克罗米芬,第7~第9天肌肉注射150国际单元HMG,跟12天给5000国际单元HCG,第14天取卵。正在此进程中,可以测定血中激素水平跟利用B型超声波技巧去监测卵泡发育。采取这类药物安慰方式可以取得多个卵子,而且取卵工夫根本流动正在打针HCG后34~36小时。两、正在超声波监测下取卵取卵的方式林林总总,可以剖腹取卵、经腹壁用腹腔镜取卵、正在超声波图象指点下经腹壁或膀肽穿刺取卵,这些操作过程病人须要全身麻醉,苦楚较大,取卵也比力难题。现阶段较进步前辈的取卵方法是经阴道取卵。将一个可扫描240度角的阴道超声探头放进阴道,丈量好卵泡的精确地位,再用流动好角度的穿刺针沿着超声波图象上的导线刺入卵泡内。用负压安装将卵子吸入盛有培养液的试管内。这类取卵方法仅需局麻,病入苦楚少,穿卵精确。用这类技巧正在每一个病人身上均匀每次可取到5个卵子。我国也把握了那一进步前辈的取卵方式,1989年9月20驲,一例经由过程阴道取卵、体外受精的试管女婴正在北京医科大学第三临床医学院诞生。三、试管内受精卵子收罗后培育正在露8%~10%排卵期妇女血清的培养液中,4~8小时后每一个卵子与颠末挑选的5万到50万高活气精子配合温育12~24小时,若是正在显微镜下见到两个原核即证实已受精,再继承培育24~48小时。四、胚胎移植正在卵子掏出后30-50个小时,用一个十分细的带套管的导管,将团结成2~6个细胞的胚胎经宫颈口植入子宫内,普通植入三个胚成功率较下。外洋比力好的“试管婴儿”中。心的怀胎率正在25%~35%,婴儿出生率为15%~22%,每医治周期的均匀成功率约11.5%,活婴产率约为7.5%。“试管婴儿”常常正在胚胎植入时失利,受精卵不克不及正在子宫内膜着床。此外怀胎后流产率较下,40岁以上妇女更易产生流产。围生期殒命的次要缘故原由是多胎怀胎。迄今为止地球上已出生了l万个以上“试管婴儿”,“试管婴儿”技巧仍正在疾速开展,例如受精卵高温(- 197℃)冷冻方式的树立,为“试管婴儿”技巧供给了更便利的前提。此后地球大将会呈现更多的“试管婴儿”。1994年,北京医科大学第三临床医学院利用冷冻胚胎停止胚胎移植获得成功,解释我国正在这个范畴又迈进了一步。

试管取卵机会的取舍关乎试管成败。思量因素较多方针是取到及格的卵泡

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